Современный Портал о ВИЧ
Обратная Связь Карта Сайта Поиск по Сайту

Найдено золотое решение для доступного теста на ВИЧ

31.10.2012

Жители бедных стран часто не могут вовремя получить надлежащего лечения из-за отсутствия диагностических тестов. Учёные из Имперского колледжа Лондона (Великобритания) пришли к несколько парадоксальному решению: им поможет золото.

тест на вич золото

Схема плазмонного иммуноферментного анализа: а) восстановление катионов золота пероксидом даёт либо сферические наночастицы и красное окрашивание, либо нерегулярные сгустки разных наночастиц и синие окрашивание. (Илл. Nature.)

Один из наиболее распространённых диагностических тестов ELISA (иммуноферментный анализ, ИФК) использует небольшие пробирки, покрытые специфическими антителами, которые способны связываться со строго определёнными молекулами (антигенами) в образце крови, продуцирующимися бактериями, вирусами или раковыми клетками. После внесения в пробирки с антителами образцов крови их отмывают от несвязавшихся антител и вновь добавляют меченные специальным ферментом специфические антитела (второй набор). После этого антигены оказываются зажатыми между молекулами иммобилизованных и меченых антител. Цветная ферментативная реакция идёт в присутствии перекиси водорода и субстрата, представленного неокрашенным соединением, которое в процессе пероксидазной реакции (катализируемой тем самым ферментом, привязанным к антителу из второго набора) окисляется до окрашенного продукта (см. видео ниже). Интенсивность окрашивания зависит от количества выявленных специфических антител, и потому результат оценивается спектрофотометрически. К сожалению, такое оборудование весьма дорого и во многих случаях попросту недоступно.

Британцы разработали свой вариант ELISA — плазмонный иммуноферментный анализ, который позволяет качественно оценить получаемый в тесте результат без привлечения какого-либо специального прибора. Просто «на глаз».

Обновлённый метод основан на способности пероксида водорода восстанавливать катионы золота, осаждая их в виде металлических наночастиц. Скорость этой реакции определяет то, какие именно наночастицы будут образовываться. Низкая концентрация пероксида означает медленный рост, который приводит к формированию беспорядочных сгустков наночастиц разного размера. Высокая концентрация пероксида, напротив, обеспечивает быстрый рост сферических частиц правильной формы.

Благодаря способности наночастиц золота взаимодействовать со светом и особенностям этого взаимодействия нерегулярные сгустки наночастиц окрашивают раствор в синий цвет, в то время как сферические частицы правильной формы дают красное окрашивание (речь идёт о плазмонах). Таким образом, в плазмонном иммуноферментном анализе второй набор антител несёт на себе фермент каталазу, который разрушает пероксид. После добавления второго набора антител и промывки в образцы вносится раствор пероксида водорода. Если анализируемый образец крови содержит искомую молекулу, то антитело из второго набора обязательно свяжется с ней, позволив каталазе разрушить бóльшую часть пероксида. В результате добавление раствора золотых ионов приведёт к очень медленному росту нерегулярных агрегатов наночастиц, что, в свою очередь, вызовет синее окрашивание в пробирке. Если же искомого протеина в образце крови не было, второе антитело не сможет ни с чем связаться и будет вымыто перед добавлением раствора пероксида. Таким образом, проба золотыми ионами даст красное окрашивание.

Конечно, это не количественный, а скорее качественный анализ (есть/нет, много/мало), но в большинстве случаев, таких как ВИЧ, этого достаточно. Более того, чувствительность метода такова, что позволяет определять ВИЧ-инфекцию при концентрациях её маркера настолько низких, при которых даже «золотой стандарт ВИЧ-диагностики» даёт (ошибочно!) отрицательный результат.

Подробности нового метода изложены в журнале Nature Nanotechnology

Подготовлено по материалам NewScientist.

Источник

Интересно? Поделитесь статьей с другими:
Впервые в мировой практике генное редактирование полностью излечило от ВИЧ
Применив технологию редактирования генома CRISPR/Cas9, американские исследователи удалили вирус ВИЧ первого типа из ДНК трех видов животных, включая «очеловеченных» мышей с иммунными клетками человека.
Просмотров: 18725
Девочка из ЮАР победила ВИЧ
девочка из Южной Африки, родившаяся с вирусом ВИЧ, получила курс лечения сразу же после рождения, после завершения терапии уже девять лет живет в состоянии ремиссии
Просмотров: 49907
Биологи научились очищать инфицированные клетки от генов ВИЧ
Генетики показали возможность глубокого редактирования генома зараженных ВИЧ иммунных клеток. Использование новых технологий CRISPR/Cas9 позволяет удалить из него все вирусные гены – и, более того, надежно препятствует их повторному встраиванию.
Просмотров: 116999
ГМ-бактерии вагинальной микрофлоры защитят от ВИЧ
Калифорнийская биотехнологическая компания Osel рассказала о прогрессе в разработке нового подхода к профилактике СПИДа, основанного на использовании естественных защитных свойств вагинальной микрофлоры.
Просмотров: 99035
Учёным впервые удалось удалить вирус ВИЧ из культивируемых клеток человека
Команда исследователей Медицинского факультета университета Темпл разработала способ извлечь интегрированные гены ВИЧ-1 из культивируемых клеток человека.
Просмотров: 132189
Для борьбы с ВИЧ предложили противораковый препарат
Датские исследователи в ходе международной конференции по СПИДу AIDS 2014, проходящей в эти дни в Мельбурне (Австралия), сообщили мировому научному сообществу об успешном опыте применения противоракового препарата ромидепсин (romidepsin) для реактивации встроенных в иммунные клетки организма вирусных частиц, пребывающих в спящем состоянии, не поддающихся антиретровирусной терапии и являющихся причиной рецидивов, пишет The Guardian
Просмотров: 129652
Создана методика стопроцентного излечения от гепатита С
Устойчивый вирусологический ответ (отсутствие РНК вируса в крови) через 12 недель от начала терапии был зафиксирован в среднем у 97 процентов участников.
Просмотров: 148934
В США одобрили для применения новый ингибитор интегразы Tivicay (dolutegravir)
Управление по продуктам и лекарствам США (FDA) одобрило к применению на территории страны Tivicay (dolutegravir) - новый препарат для терапии ВИЧ-1,  разработанный GlaxoSmithKline, сообщается на сайте ведомства.
Просмотров: 119668